Re: [方法] ROS 的測定方法
※ 引述《anti0822 (anti0822)》之銘言：
: 納在請問一下~我想測加藥後~是否可以增加ROS的量~那我是先染DYE~在加藥嗎~還是先加要再染DYE
: 麻煩了!
端看你的藥物作用是多久而定
一般來說這些測ROS的染劑我染最久都不超過1小時
原因有三
一是這些染劑基本上都容易被氧化而形成螢光產物
因此當染太久的時候會大幅提高背景值進而導致藥物處理的變化被稀釋
二是這些染劑對細胞的影響不可預期
為了減少多餘的不確定因素來影響實驗的結果
因此不建議染太久
最後是一般來說ROS在細胞內的半衰期都很短
且大部分造成ROS上升的反應都是立即且快速的
所以染太久意義應該不大
但不可否認的會看到有些染12甚至是24小時的paper
這通常是觀察藥物影響抗氧化酵素諸如CAT or SOD等表現或是活性
進而是否會造成細胞內ROS level的改變
因此一切還是取決於您自己的實驗設計與操作
最後祝妳實驗順利
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