Re: [求救] PC12 Culture 問題
因為我自己現在也在養這一株細胞
之前也有發生過這樣的狀況，還以為是我細胞沒有凍好>.<
所以提供妳一些方法參考看看嚕
1.我養細胞的plate都會先用100 μg/ml poly-L-lysine hydrobromide solution
(Sigma, no. P6282)coating過，時間是60min，37度。這個很多paper上都有用
蠻常見的。coating過以後細胞不太會掉，還不錯。至於妳用的collagen，我也有用
只是我是用於要分化的狀態的細胞，就是接著在剛剛的PLL後面再coating一層，
10 μg/ml rat tail collagen Type I (Sigma, no. C3867)。這個要先用PBS去稀釋
，RT放120min即可。
2.剛解凍的細胞要拿出來放到plate養的時候，記得一定要用大孔徑的、
至少5ml的吸管去吸，因為我之前就是什麼都注意到了，但是這個沒注意
剛解凍的細胞是很脆弱低。
3.凍細胞用全FBS去凍，ATCC的建議沒有這樣寫，不過我家的博士建議我這麼做
效果也確實很好。(當然也要內含7%DMSO，這就不贅述了）
4.細胞剛種下去的時候，不要一直去看它。可以的話隔天在去看，又或是至少要格
個半天，不然貼附的黃金時間過了，真的會很難貼。
5.凍細胞的DMSO要用最高級culture的，對細胞沒毒性，可以隔天貼附好了再換Media
也ok。
以上這幾點是我實驗上的實作心得，希望對妳有幫助。
也期望其他更厲害的專家不另指教！！感謝囉！！
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