Re: [求救] western blot

看板Biotech (生命科學)作者 (我不要現在就出征....)時間17年前 (2009/03/07 11:48), 編輯推噓3(302)
留言5則, 3人參與, 最新討論串4/5 (看更多)
嗯 我也是有在懷疑sample的問題 我昨天又做了一片 但是我換了acrylamide 然後在用染色液染 發現我的sample有跑下來 只是為什麼我的marker一樣72跟95的band還是分不開呢?? 且我的一抗是beta-actine 照理說應該要在43的位置不是嗎?? 為什麼呈色完還是一直在72-95之間呢?? 一直沒辦法理解 還是謝謝各位大大的幫忙 有可以解決問題的請跟我說一下 謝謝你們 ^^ ※ 引述《phyton (飛騰)》之銘言: : 看起來像是 sample 裡有未溶解的雜質 : 有時候 DNA 也會造成這個歪歪的樣子 : 或許可以試看看 loading 前 (其中一種或多種混合) : 1)離心一下取上液 : 2)超音波打一打 : 3)過針頭很多次 : 不過老實說,如果不需要精確定量 : 也沒什麼關係啦 : ※ 引述《willie0208 (我不要現在就出征....)》之銘言: : : 又來向各位大大求救了 : : 最近做的western blot : : 呈色後跑出來的膜看起來都好奇怪喔 : : http://www.wretch.cc/album/album.php?id=willie0208&book=6 : : 有沒有大大可以解釋一下有什麼特別的原因嗎?? (1抗 beta-actin) : : Buffer都有重新配過了 : : 組織的Sample也都重新均質過了 : : 1抗 2抗都重新配過了 : : 現在想不出來到底問題在那裡 : : 有大大可以幫忙嗎???? : : 謝謝你們 ^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.71.94.5

03/07 12:01, , 1F
染色液?一抗?兩片?
03/07 12:01, 1F

03/07 12:23, , 2F
我是做兩片膠 然後去用com blue去看我的蛋白質狀態
03/07 12:23, 2F

03/07 12:24, , 3F
然後一抗是我之前做過的DATA 呈色完怪怪的
03/07 12:24, 3F

03/07 13:43, , 4F
buffer條件是啥?
03/07 13:43, 4F

03/07 17:04, , 5F
把詳細步驟寫出來吧,真的看不太懂,而且marker看起來很好?
03/07 17:04, 5F
文章代碼(AID): #19iUwFl0 (Biotech)
討論串 (同標題文章)
本文引述了以下文章的的內容:
完整討論串 (本文為第 4 之 5 篇):
6
12
10
21
文章代碼(AID): #19iUwFl0 (Biotech)