[求救] 關於RAW264.7細胞暴露問題

看板Biotech (生命科學)作者 (其實我要的很簡單)時間17年前 (2009/03/25 12:33), 編輯推噓4(403)
留言7則, 4人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 我想請教各位關於細胞暴露的問題, 我的實驗是將微粒暴露到RAW264.7細胞, 然後用ELISA kit測TNF-a, 但問題是control組(暴露PBS)的TNF-a釋放量一直都很高(800 pg/ml以上), 我試過很多條件都沒辦法解決... 包括seeding的細胞數和時間, 也換過細胞株,換過medium配方, (現在是使用含有酚紅的DMEM medium) ELISA standard curve沒問題, 現在細胞看起來是圓圓亮亮的, 已經想不透是什麼問題造成的 想請教有類似經驗的高人幫我想想辦法 感激不盡>"< -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 122.121.181.180

03/25 13:46, , 1F
小弟的大約是700 pg/mL左右......有幫助嗎XD
03/25 13:46, 1F

03/25 13:47, , 2F
因為我LPS誘導後是40 ng/mL左右,所以不覺有異......
03/25 13:47, 2F

03/25 16:55, , 3F
血清中TNF有考慮過嗎
03/25 16:55, 3F

03/25 16:57, , 4F
我以前會做一個血清medium當作背景值扣掉 應該就會漂亮些了
03/25 16:57, 4F

03/25 17:46, , 5F
我用RD kit, medium only 大約400pg/ml,具有重複性
03/25 17:46, 5F

03/25 19:15, , 6F
請問這樣是正常的狀況嗎?跟血清品牌有關嗎?
03/25 19:15, 6F

03/26 21:50, , 7F
每一批血清的濃度都會不太一樣 所以要做一個medium control
03/26 21:50, 7F
文章代碼(AID): #19oRGZw- (Biotech)
文章代碼(AID): #19oRGZw- (Biotech)