Re: [求救]關於zymography中gelatin的選擇
※ 引述《citrus (小花)》之銘言:
: 請問有經驗的前輩們做zymography中的gelatin牌子會有差嗎
印象中是沒差,protein沒壞就可以了
: 之前在別人家學時是用sigma typeA 的gelatine
: 而我用自己實驗室現有的做(忘了 很大瓶裝的)
: 跑出來感覺清晰度有差 不知道是不是這個因素
如果你對protein有疑慮的話,可以請對方的實驗室給你一點gelatin
在自己的實驗室重做一遍就知道了
: 另外
: 我用室溫二次水稀釋gelatin覺得有點不好溶是正常的嗎(瓶底會有一點膠狀物沉澱)
是的,gelatin非常的不好溶
: 有看到網路上有人建議需用55度二次水
: 還有其他改善方法嗎
: 謝謝
我們實驗室用過兩種方法
第一個方法是不要加入TEMED和APS,其他膠的配方配好
加入gelatin,然後使用超音波震盪機將gelatin震溶
另一個方法比較偷懶
比方說我們實驗室的配方是10cc的膠體溶液內需含有0.01g的gelatin
此時就將此配方中的純水部分(我以前用的配方含純水量約4.6g)
4.6g*10的水裝入滅菌瓶,加入0.01g*10的gelatin
然後滅菌,gelatin就很簡單的溶化了
開過的水我們之前會習慣冰在冰箱,最長紀錄是使用1個月以上
實驗結果看起來都還好
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