Re: [求救] micronucleus test
可是我主要是要看經由treat產生的binuclear cells 有多少cell會有micronucleus
所以我想taxol的方法好像不適合拿來用... (希望沒說錯)
因為PHA會使血球細胞aggregate 所以treatment的部分我也有些疑惑
protocol上寫treat44小時後再加cyt-b 需要remove PHA再加cyt-b還是可以直接加?
(可是在culture一兩天就可以看見明顯的沉澱 也不知道那裡面是活的還死的細胞)
老師是說看要不要treat 2個小時後remove PHA 可是也不知道這樣會不會沒效...
想問問也有用血球細胞加入PHA和cyt-b treatment的高手們
能不能給點建議or你們的作法 (ex:compound的廠牌和濃度 treat時間和cell density)
因為我目前是follow那篇paper的protocol 可是做不太出來Orz
p.s大家養PMN或MNC(用圓底的culture tube) 是直接靜置還是會讓它shake or 轉轉轉
另外也想問問做臨床的版友們 病人的血清你們是採用過濾滅菌還是照UV而已
如果是用過濾滅菌 是選用多少孔徑的filter呢? 謝謝~
※ 引述《oplz (Go Patriots! Go Brady!)》之銘言：
: 如果你的目的是要造成 micronuclei..
: cyto-B 並不是一個好方法 blocking contractile ring 只會給你 binuclear cells
: 最有效的方法是-
: 1. taxol to arrest cells in mitosis
: 2. RO-3306 to force anaphase entry
: 3. washout RO-3306 and taxol after 90 min
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