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包涵體內的蛋白質可當抗原??

看板Biotech (生命科學)作者 (一個人只能全力以赴！N)時間16年前 (2009/06/30 22:13), 編輯推噓1(1推 0噓 7→)
留言8則, 6人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
不好意思我想請問,如果我的重組蛋白表現後大部分都在 inclusion body, 該重組蛋白帶有 GST tag,請問我可以純化之後直接打兔子讓它產生抗體嗎? 不懂的點在於,純化後是否''一定''要做 refolding 的動作才可以!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 59.112.81.236
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06/30 22:51, , 1F
看你抗體目的。檢測用的比較沒差，要具保護力的有差。
06/30 22:51, 1F
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06/30 23:11, , 2F
看目的+1
06/30 23:11, 2F
推
07/01 02:33, , 3F
看你要做western還ELISA囉
07/01 02:33, 3F
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07/01 02:35, , 4F
有試過不同誘導條件嗎? 在inclusion body裡不是很妙
07/01 02:35, 4F
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07/01 11:55, , 5F
不會..在Inclusion body反而純度高..更好純化
07/01 11:55, 5F
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07/02 00:10, , 6F
我也是這樣，用denature純化(urea)，但純化出來後用PBS透析
07/02 00:10, 6F
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07/02 00:11, , 7F
準備打雞，但透析後蛋白質全都變白色沉澱物，要怎讓它溶呀?
07/02 00:11, 7F
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07/03 12:19, , 8F
urea的濃度要慢慢降，上清液收集沉澱物繼續透析
07/03 12:19, 8F
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