[求救] Sample preperation for MALDI-TOF
最近有個實驗是要找出 Chemical labeling 片段
目前想用 MS 來做
我們實驗室並沒有經驗
最近幾次跑 MALDI-TOF 結果都沒有訊號 Orz...
(結果都是小分子，應該是鹽類)
樣品是 Purified Membrane Protein
附近實驗室都是走2-D膠 → In-gel Digestion流程
所以不知道我們的步驟那邊有問題
希望可以在這裡求到解答
以下是實驗流程：
純化的 Protein (10-20 ug in 200λ)，加入 Chemical (對照組則不加)
↓
反應完用濃縮管除去鹽類、未反應的 Chemical，並以純水清洗三次
↓
濃縮後的體積約 50 λ，加入 Trypsin (1:20)，37℃ 16 hr
Trypsin 購自 Promega (Sequencing Grade)
↓
Trypsin 作用完，抽真空去除水，交給技術員跑MALDI-TOF
以上...
先謝大家了 >"<
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