[求救] Western有很多 non-specific 的bands
小妹非Western達人，有請高手幫忙
不知道為何，我只要是poly-anti rabbit的抗體 一律會壓出此類的狀況
就是一整個non-specific的band
如圖 http://www.wretch.cc/album/show.php?i=eleisonhsu&b=1&f=1225232433&p=0
上面那張是beta-actin，下面那張是我要壓的蛋白質
我想要看到的sizes大約是在24kD
可是我看不到任何一條可以稱為是有壓到的專一性的band
重作很多次也一樣 由於是overexpression的protein 我也沒有postive的control
現在很苦惱，不知道該怎麼辦，實驗室很少人做，也沒有可以參考的前例
我沒有定量sample，不過大約是60ug
一抗是1:500 O/N
二抗1:2500 1hr 還故意用BSA做blocking
WASH 10 min*9次 完全照一般的PROPOCAL
不知道是否有人可以給點意見? 請高手救我!!>< PLEASE~
十分感激!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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