Re: [求救] 請問轉基因鼠怎麼分wt和mutant?

看板Biotech (生命科學)作者schmitt (小密特)時間16年前 (2009/08/07 17:48)推噓1(1推 0噓 1→)

留言2則, 2人參與討論串3/3 (看更多)

想要搭個便車問問題我有200多隻老鼠聽學長說是 B6 和 FVB 生出來的那我如果想要知道這些老鼠那隻是比較靠近 B6 的鼠種請問我要怎麼去測量呢 ※ 引述《kaifish (喔.....................)》之銘言： : ※ 引述《hickory (C'est la vie)》之銘言： : : 請問一下板上有在做老鼠的學長姐們小弟念到一篇論文，用老鼠來做 : : MECP2基因缺失的實驗。這篇文在材料方法中提到 : : All of the mice used in these experiments were generated by crossing : : heterozygous female Mecp2 Flox/+ mice that had been backcrossed to : : 129S6/SvEvTac for at least five generations to male mice on either a pure : : FVB/N background or male mice on a pure C57BL/6J background to generate : : isogenic F1 animals. Only male animals were used for all the experiments : : listed with WT littermate males serving as the controls. : : 我自己對這一段的理解是他用 129S6 ，基因型 XX 的母鼠和 : : FVBN、C57BL/6J 兩種品系的公鼠去交配，變成 XX XY : : (此基因X-Link，X代表某基因被Knokout，X是正常性染色體) : : 生出子代的公鼠有兩種，一種是 XY ，一種 XY : : XY 拿來做實驗；XY當作 wild type control : : 但我的問題是，實驗者怎麼知道這隻老鼠是 XY 還是 XY ？ : : 想了很久，不得其解，來版上請學長姐不吝賜教 : : 附上原文 http://www.badongo.com/file/15942038 : 從內文看來，floxed allele仍保留neo cassette : 所以 WT 的 X染色體與floxed X染色體之間，長度就有差異(neo cassette約 2 Kb) : 因此只要切小鼠的尾巴抽DNA : 利用PCR或是Southern blot就可以看出小鼠的 X 染色體是WT 或 floxed allele -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 219.85.86.155