[求救] 如何將感染後的細胞及細菌分離???

看板Biotech (生命科學)作者 (just do it)時間16年前 (2009/09/18 18:59), 編輯推噓8(8016)
留言24則, 7人參與, 7年前最新討論串1/1
小弟目前遇到一些問題 利用病原菌感染魚類細胞株,希望在感染過後 看胞內蛋白的表現,但希望能夠感染後將病原菌和細胞分離 這樣可以單純看其胞內蛋白的表現 我想知道有沒有方法可以分離,細胞株不限制 主要是細菌感染細胞就OK 不知道有沒有人再做這方面的實驗,或者有哪方面的paper可以參考 我有用過 infection proteomic bacterial 等 key word 在NCBI收尋 不過似乎沒有我想要的paper 好像很少人做這方面的實驗 不知道板上的大大,知道國內或國外有誰在做這方面的東西 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.101.28.123

09/18 21:23, , 1F
無參考文獻,純粹提供idea:利用細菌與細胞離心所需轉速的
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轉速的不同 ex.細菌通常需3000rpm以上,細胞只需800rpm左右
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09/18 21:27, , 3F
抱歉耍笨orz,我指的是尚未感染進入細胞的細菌分離方式
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09/19 01:16, , 4F
用磁珠阿....只要抓細胞嘛 @@?
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若是細菌感染細胞會抓著細胞不放,離心只能將未抓住細胞的
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細菌與細胞分開,但是最多也只能這樣了
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另外一個方法就是加入含有抗生素的培養基殺細菌,但是前提
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是這個細菌可以用相對的抗生素毒殺,缺點是收細胞的時間點
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難以定義
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不能很單純的用2組,1組有感染,1組mock來做比較嘛?!
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用抗生素的方法目前已經在做
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真的如你所說,時間點難抓,我們的目的就是要看host cell在
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被細菌感染後,蛋白的表現,只是抗生素會將host也殺掉,因
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此再找其他方法分離
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還有一個方法,如果你們萃取的蛋白的方法不會收到細菌的
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蛋白的話,也許就不會影響實驗~
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當然若要如此做之前還是要先測試看看
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把HOST改造成抵抗抗生素?
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改造~是可以考慮,但是可能會把實驗複雜化
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只是多一步把resistant vector送進去後做stable clon
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好像也是~ 呵呵 不過這要在原PO使用抗生素去除菌 的前提下
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但是使用抗生素除菌 比較無法確認菌是否真的都去除了~呵
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轉速的不同 ex.細菌 https://muxiv.com
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01/03 17:01, 7年前 , 24F
只是多一步把resis https://noxiv.com
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文章代碼(AID): #1AisWd4o (Biotech)
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