[求救] western

看板Biotech (生命科學)作者 (Bu)時間16年前 (2009/10/21 20:54), 編輯推噓4(4013)
留言17則, 8人參與, 7年前最新討論串4/4 (看更多)
最近跑western用了一支新的抗體 sample分別是cell lysate和從tissue抽出來的protein 壓片完發現cell lysate的band和tissue的band差了大概20 KDa 正常來說不是應該要一樣嗎? 請問有人遇到這問題過嗎? 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.118.178

10/21 20:56, , 1F
找PAPER看看你的蛋白有沒有PTM?
10/21 20:56, 1F

10/21 20:57, , 2F
沒有的話做IP後打MASS 如果兩個是同樣的話...應該就
10/21 20:57, 2F

10/21 20:57, , 3F
不用擔心畢業問題了?
10/21 20:57, 3F

10/21 21:14, , 4F
請去swissport確認一下alternative splicing
10/21 21:14, 4F

10/21 21:20, , 5F
PTM在cell和在tissue會不一樣嗎?
10/21 21:20, 5F

10/21 23:14, , 6F
PTM應該不會差那麼多吧 @.@a 20kDa ?
10/21 23:14, 6F

10/22 01:15, , 7F
SUMO就是差20kD
10/22 01:15, 7F

10/22 03:16, , 8F
你原先的protein mw多少 我之前遇到過差一倍 剛好是dimer
10/22 03:16, 8F

10/22 03:17, , 9F
會不會你的ab specificity不夠 抓到其他蛋白質
10/22 03:17, 9F

10/22 03:17, , 10F
有沒有multiple band, 還是只是單一band?
10/22 03:17, 10F

10/22 03:18, , 11F
我建議你找你老闆討論 或是把照片上傳上來 ps 這年頭還有
10/22 03:18, 11F

10/22 03:18, , 12F
人在壓片阿~~@@ ?
10/22 03:18, 12F

10/22 08:56, , 13F
我也還在壓 實驗室裡有gel doc可是沒有人喜歡用
10/22 08:56, 13F

10/22 11:46, , 14F
底片壓的sensitivity 比較高阿 機器照的background會偏高
10/22 11:46, 14F

10/22 11:47, , 15F
各有利弊
10/22 11:47, 15F

11/11 01:48, , 16F
SUMO就是差20kD https://muxiv.com
11/11 01:48, 16F

01/03 17:02, 7年前 , 17F
//muxiv.com https://daxiv.com
01/03 17:02, 17F
文章代碼(AID): #1AtmHeX_ (Biotech)
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