Re: [求救] Raw細胞分化成 OC
這幾天看來,似乎沒有版眾願意回答....
或許是撇步不容易在文字中敘述清楚吧!
不知道大家知道有哪間實驗室有在做類似實驗,能夠去討教的呢?
謝謝!
: 標題: [求救] Raw細胞分化成 OC
: 時間: Thu Oct 29 17:09:33 2009
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: 最近實驗要開始做將 RAW 264.7 分化成 osteoclast 細胞的實驗。
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: 根據paper所敘述,加入 RANKL 50 ng/mL 處理五天後,
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: 染 TRAP 若看到三核即為 osteoclast
:
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: 第一次實驗細胞數量沒抓對,五天處理下來,細胞數量爆高。
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: 相互堆疊,造成辨認的困難。
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: 第二次實驗將細胞數減至1/4 ,五天處理下來,細胞大約只佔了整個well的不到五成。
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: 而且並沒有觀察到有比較大的細胞產生(因為osteoclast是三核,應該會比較大顆)
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: 對於positive control竟然沒有分化現象出現,想上來求救一下。
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: 看板上是否有其他人實驗室曾做這種實驗,希望可以求教!
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: 另外,染TRAP部分。因為我們把細胞種在 24 well中處理,
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: TRAP染色也是直接把染劑丟進去。
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: 卻發現這樣無法使用高倍的倒立式顯微鏡觀察。
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: 請問其他人是怎樣處理種在well中的細胞呢?
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: 應該去找正立高倍的顯微鏡?或是有其他方法可以處理?
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: 謝謝
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