Re: [求救] 細胞汙染
※ 引述《Lanzakuo (尋找愛情留下的痕跡)》之銘言：
: 最近養細胞出現了大問題
: 我們是跟隔壁實驗室拿細胞回來養
: 他們養的同一批解凍的細胞狀況很好
: 所以首先排除是細胞原本的問題
: 當我細胞拿回來經過第一次分盤後
: 大概兩天左右~細胞形狀開始有點改變
: 然後細胞內部有氣泡出現~
: medium顏色變黃很快~用顯微鏡看不到有汙染的現象
: (我認為的細菌汙染在顯微鏡下應該可以看到黑色顆粒在動
: 如有不對請指正~感激~)
: 但是若從底部對著光線看 可以看到有沙狀的物體在飄~
: 再過幾天細胞就飄了~請問這是何種污染呢?
: 另外再請教一下~無菌操作台和培養箱非架設在獨立空間
: (和普通實驗室放在一起)
: 房間內無UV燈(只有無菌操作台內有)~
: 汙染的機會會比較大嗎??感謝回答!!
大大的問題我從以前念碩班到現在當助理的實驗室都有遇到
症狀類似
1.確定不是細菌或yeast污染，大小形狀都不對，不會讓medium混濁
生長緩慢
2.不一定會讓細胞死掉，但是就長不好，顯微鏡下看起來細胞會有一些亮點
3.顯微鏡看就細細的黑色沙狀物體，會做布朗運動，不會像細菌快速移動
4.有時候會覺得是細胞碎片，但是隨著培養的時間會越來越多，也會讓medium變黃很快
5.可能會由incubator空氣傳染(有中的會讓別人的細胞也中)，
但最奇的地方是如果只放medium test不會有，要有細胞才會長?
我們有做過mycoplasma test，但不是
對岸的文章他們稱做黑膠蟲，英文則是black dot
目前沒有定論是什麼，可能是一種微細菌，可以通過filter
P/S確定無效，G418我加過效果不好
有人說是血清帶來的，但是我medium怎麼測試就是不會有
如果不重要的細胞建議就丟掉，如果重要的細胞據國外論壇說
多用PBS洗幾次，或是不要讓細胞密度太低
我現在有一批stable clone的細胞也中....傷腦筋
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