Re: [求救] 脂肪初代細胞
※ 引述《mzac1b (Goodday)》之銘言：
: ※ 引述《nipon830 (妮碰)》之銘言：
: : 我最近在養脂肪的初代細胞
: : 一開始先從小鼠身上取下副睪脂,在經剪碎後進行之後的步驟
: : 但做了兩次後發現都有嚴重汙染的現象,
: : 器具溶液都經過滅菌了
: : 且毛皮都扒得很開
: : 請問會是什麼原因呢?
: 呵呵
: 這個我也在養說
: 我試養大鼠和人類的
: 但我很少污染
: 至少養個頭兩三代幾乎沒污染過
: 其實多噴酒精就沒問題了
: 保險一點的話
: 1.剃毛替乾淨一點
: 2.多噴酒精噴的非常非常濕
: 3.剪刀夾子要滅菌
: 4.分內外剪, 外剪剪開皮
: 內剪處理內部
: 5.過程中在無菌操作台操作
: 我個人經驗
: 是在動物室的實驗室內操作
: 不是無菌操作
: 就算不剃毛
: 噴很多酒精一樣沒事
: 我的剪刀只有一副可是老鼠不只ㄧ隻
: 處理完一隻噴個酒精擦一擦繼續做一樣沒事
: 培養液的話我就必加抗生素
: 就ㄧ般細胞培養的濃度
: 會不會是你的操作環境不乾淨?
: 或培養細胞的環境不乾淨?
回應最原po的問題
用的buffer是KRPH buffer
會分不清楚是油滴還細胞主要問題出在離心不夠完全
汙染的問題就如同m大說的一樣多用酒精
我這裡基本上是把器具泡在酒精裡
如果還有任何疑問其實可以去圖書館借
"Method in Molecular Medicine" vol 83 Diabetes Melitus: Methods and Protocol"
我貼的那篇Cell metabolism基本上都是靠這本書的方法做的
--
誰都可以看得出 我臉上滿是寂寞無奈
你卻用無情的眼神 放逐我到無窮的思念國度 獨自流浪
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◆ From: 160.94.47.16
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