[求救] 基本的螢光實驗問題...

看板Biotech (生命科學)作者 (Tina)時間16年前 (2010/05/26 21:53), 編輯推噓2(207)
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我們這次的生技實驗 流程如下: 1. 將 quinine 和 unknown drug 加入 well 中反應 2~3 hr (圖示如下) 每組4個 well → ○ ○ ○ ○ con. 1μl 5μl 1μl quinine quinine unknown 2. 棄上清液 → PBS 0.5 ml wash 2次 → 4% 0.2 ml KFA fixation 10 min. 我們做的步驟到這結束,其他是助教幫忙做的 3. 螢光顯微鏡觀察 PI 和 GFP. 我的問題是 → quinine 濃度和螢光有什麼關係? (我查到的資料是呈正比,但為什麼? 是無限正比嗎?) → photobleaching 是什麼?要如何避免對螢光觀察的影響? → 老師之前的實驗用到一個叫Gene Jammer的東西,那是什麼? (查不到) Gene Jammer和血清又有什麼關係呢? (因為那時用不含血清的plate) 不好意思 問題很多! 我還是初學者 請大家多多包涵! 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.178.26

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Gene jammer是一種transfection reagen,號稱毒性低
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photobleaching就是激發能量過強,造成放不出螢光(能量都
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耗盡了,要經過一段時間,讓電子恢復後,才能再度激光)
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photobleaching.... 感覺雷射要很強...
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※ 編輯: tina3q 來自: 163.15.178.26 (05/26 22:39)

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culture room那台要照到GFP photobleach大概要擺個
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2.3小時以上 還有你應該要去問邱老師GFP代表甚麼蛋白
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該蛋白在整個實驗中的意義 而不是片斷的擷取後上來問
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喔喔! 現在整個東西都還很亂跟同學討論答案也都不太相同
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我會去問清楚的 感謝 :D
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文章代碼(AID): #1B_IViL7 (Biotech)
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