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[求救] 請介紹DNA聚合酶給我

看板Biotech (生命科學)作者 (elmo軒)時間16年前 (2010/05/01 10:51), 編輯推噓12(12推 0噓 25→)
留言37則, 13人參與, 最新討論串1/1
我需要一種限制酶 在做完PCR號不會在3'端留下一個adenine 常見的Taq會留下 我是要做sticky-end PCR THANKS -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.124.250.3
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05/01 11:03, , 1F
看不懂.....= =
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05/01 11:04, , 2F
你搞得我頭好痛
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推
05/01 11:28, , 3F
你要的是不會加A的Taq才對 我們lab使用phusion
05/01 11:28, 3F
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05/01 11:28, , 4F
sticky-end PCR我們lab常常使用
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推
05/01 11:44, , 5F
Vent Taq也可以~!
05/01 11:44, 5F
推
05/01 12:06, , 6F
HIFI也是
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推
05/01 12:24, , 7F
那算是一種限制酶嗎???
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05/01 12:36, , 8F
sorry 我講的不好
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05/01 12:36, , 9F
謝謝幫忙
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05/01 12:38, , 10F
請問pfu可以嗎?
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05/01 12:46, , 11F
你可以看看那隻polymerase的說明書 一般都會明白跟你講
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05/01 12:46, , 12F
會不會多加A
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05/01 12:46, , 13F
回應的時候應要看清楚sticky or overhangs or blunt ends
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05/01 12:48, , 14F
有proofreading 3'->5' exonuclease activity就可做出
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05/01 12:48, , 15F
我反而不懂樓上在說什麼 囧..
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05/01 12:48, , 16F
歐 看懂了 沒看到下一段
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05/01 12:48, , 17F
"blunt end"那應該是原PO要的
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05/01 12:53, , 18F
05/01 12:53, 18F
推
05/01 12:55, , 19F
阿...我覺得他真的不是需要restriction enzyme...
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05/01 12:55, , 20F
而是需要不會多加A的DNA polymerase去做PCR..
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05/01 12:57, , 21F
所以我才覺得在題目有誤的情形下，怎麼大家回答這麼開心
05/01 12:57, 21F
推
05/01 12:58, , 22F
可是推文回答的好像都是DNA polymerase XD
05/01 12:58, 22F
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05/01 12:59, , 23F
他不過問錯方向而已 可能只是不知道有這種polymerase罷了
05/01 12:59, 23F
推
05/01 12:59, , 24F
應該不是限制酶...是polymerase
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05/01 13:06, , 25F
原po要的是""blunt end""原非""extra-A"" or "sticky end
05/01 13:06, 25F
推
05/01 13:11, , 26F
問題在於"sticky""blunt""overhang""cohesive" ends.....
05/01 13:11, 26F
推
05/01 13:12, , 27F
你是不是誤會sticky-end PCR的意思阿??
05/01 13:12, 27F
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05/01 13:17, , 28F
的確，我不懂sticky-end PCR
05/01 13:17, 28F
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05/01 13:22, , 29F
對不起，我認錯，我自己內文搞混
05/01 13:22, 29F
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05/01 13:23, , 30F
我來去把sticky-end PCR讀一讀，對不起原PO
05/01 13:23, 30F
※ 編輯: championelmo 來自: 140.124.250.3 (05/01 13:54)
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05/01 13:57, , 31F
是我把聚合酶打錯成限制酶了(又不會改標題...)sorry
05/01 13:57, 31F
推
05/01 14:03, , 32F
.......y
05/01 14:03, 32F
推
05/01 14:55, , 33F
文章前大寫T改標題....另外用PFU就可以了
05/01 14:55, 33F
推
05/01 15:14, , 34F
XDDD
05/01 15:14, 34F
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05/06 11:03, , 35F
亞醫HF也ok
05/06 11:03, 35F
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05/08 20:09, , 36F
sticky-end PCR 是什麼意思??
05/08 20:09, 36F
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05/08 20:11, , 37F
我終於看懂他要什麼了XD
05/08 20:11, 37F
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