Re: [求救] 重組蛋白低溫保存條件

看板Biotech (生命科學)作者Fourfish (～四條魚～)時間15年前 (2010/06/10 12:34)推噓6(6推 0噓 5→)

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請問你要冰幾度？保存用20%蠻常見的怕被凍壞可以提高到50% 我只能說自己試試看吧... 然後...不好意思藉這篇想跳出來分享一下最近在此板看到很多人在問 "我現在在表現蛋白請問用幾度C 多少IPTG 什麼菌能得到比較多?" "最近在純化蛋白要用什麼buffer、濃度、pH值比較好？" "純化出來的蛋白怎麼保存？能保存多久？該冰在幾度？" 很高興做蛋白研究的似乎越來越多因為自身也是在蛋白質實驗室學習的小咖看起來蛋白質很有前景XD 但每當看到這類問題出現都覺得很無奈...（對我都快變月經題了...實驗室加同學再問..）因為每個人做的蛋白質不一樣就是不一樣不像DNA or RNA說在TE或特定buffer裡面比較穩定大家的保存就都能用同一套蛋白質神奇之處就是每個都有自己的特性不同的pI 不同大小不同組成不同活性... 要怎麼能說某一種條件對所有的蛋白保存、純化或反應都是好的？有有聽說 Tris+EDTA+Glycerol 是個很多蛋白都喜歡的buffer 但也很多不喜歡例如說很多酵素都需要cofactor buffer中多了EDTA就沒辦法作用有的對溫度很敏感溫度一高就降解或沈澱甚至有的很強壯隨便丟在室溫七天七夜泡在冰筒裡游泳都沒差所以我只想跟踏入蛋白質領域的夥伴們說 "條件就是要去試了才知道不然怎麼叫做[實驗]？？" 如果現在有一套protocol或condition大家都試用那今天蛋白質研究的進展已經飛到太空去了吧... 建議如果想了解什麼條件對自己的蛋白可能比較好先去查文獻什麼蛋白跟你的最像條件是什麼去試試試了就知道想徵詢其他夥伴們的意見也該把自己蛋白的特性、活性是什麼描述一下... 不然每個人把自己實驗經驗說出來一大堆還不是一樣沒有頭緒？可能還更混亂吧... 再不然最根本對所有蛋白質都最好的方法就是：純化出來趕快用掉就對了！希望大家實驗順利 ※ 引述《lookfor0326 (find)》之銘言： : 大家好~ : 我從Ecoli中得到我要的重組蛋白，也純化好了 : 但遇到一個問題就是關於它的保存條件 : 我查到有人會把重組蛋白用甘油保存在低溫環境下 : 只是 : 我看到有些人是用20%甘油 : 也有15% 也有10% : 這些濃度都OK嗎??? : 好多條件喔 : 是哪一個呢? : 謝謝大家 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.94.157