Re: [求救] 專一性較高的Nickel resin??
看板Biotech (生命科學)作者kshsdeck (..............)時間15年前 (2010/12/25 16:57)推噓2(2推 0噓 0→)留言2則, 2人參與討論串2/2 (看更多)
※ 引述《nymph ()》之銘言：
: 請問大家
: 目前我是使用QIAGEN的Ni-NTA Resin
: 但是專一性不是很好 總是會抓到其他雜band
: 聽說resin的專一性是和nickel的帶電量有關
: QIAGEN是帶4個正電 所以專一性比較差
: 請問有其他品牌的比較好用嗎??
: 謝謝各位!!
可以換Clontech的TALON,它用的是Co,
Co對His的親和力比較低,所以雜蛋白量也會低,
但你純化過程中,buffer中的imidazole濃度也要降低,
一般Ni column常可以用到20-30mM的Imidazole去wash,
但用30mM的Imidazole去wash TALON,可能很多target蛋白就都被洗下來了,
另外還有一點,用TALON,你的buffer中不能有DTT和EDTA
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◆ From: 111.184.43.35
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12/25 17:44, , 1F
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