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[求救] 有沒有人用過gel filtration???

看板Biotech (生命科學)作者 (熱騰騰的泡麵)時間15年前 (2011/04/28 11:04), 編輯推噓5(5推 0噓 7→)
留言12則, 2人參與, 最新討論串1/4 (看更多)
小弟目前使用Hitrap desalting column進行gel filtration 這類columng是利用size exclution方式分離純化 我的inj sample是兩個分子量差距極大的protein 目的是要把大分子純化 但是一方面也想看看小分子多久會沖提出來 最近可以看到大分子很快就出來了 假設sample沒有和media binding 打入與column volumn同體積的buffer之內就會沖出來 但是結果小分子遲遲都沒有看到 可能的原因有： (1)小分子protein跑到column的media(dextran)並且binding (2)我的buffer條件（目前先使用含0.5 mM DTPA PBS） 有使用經驗的版上大大能否分享經驗呢 不勝感激！！！ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 210.60.122.10
推
04/28 12:58, , 1F
大分子小分子分別多大？
04/28 12:58, 1F
→
04/28 13:02, , 2F
大的36000 小的約400
04/28 13:02, 2F
推
04/28 13:17, , 3F
單位是AA嗎？
04/28 13:17, 3F
→
04/28 13:32, , 4F
單位是Da
04/28 13:32, 4F
推
04/28 14:40, , 5F
那小的也太小了一點，4個AA？
04/28 14:40, 5F
→
04/28 14:41, , 6F
沖到兩個CV都還沒沖出來嗎？
04/28 14:41, 6F
→
04/28 15:03, , 7F
小的是GSH 沖了2CV（約10ml）也沒看到＝＝
04/28 15:03, 7F
推
04/28 15:41, , 8F
你用什麼方法測GSH有沒有elute出來？
04/28 15:41, 8F
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04/28 22:45, , 9F
測UV280
04/28 22:45, 9F
推
04/29 09:13, , 10F
280測不出來很正常，因為GSH沒有共振環
04/29 09:13, 10F
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04/29 09:14, , 11F
下篇版友的回文有詳細說明
04/29 09:14, 11F
→
04/29 10:17, , 12F
感謝樓上的熱心解說！！
04/29 10:17, 12F
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