[求救] EGF stimulation
請問有人用EGF刺激H1299或其他肺癌細胞嗎?
實驗中要用EGF刺激下游的AKT.ERK表現
想要間接證明細胞膜上的EGFR受藥物影響
但control組本身AKT.ERK的表現量很高
導致加入EGF後看不出差異
參考文獻後發現
每篇control的EGFR.AKT.ERK的表現量差異很大
有的幾乎沒表現
有的刺激前後沒太大差異 表現量都蠻高的
paper對加EGF的部份並沒有很詳細的描述
所以想請教大家
加入EGF前需要把medium換成serum free 還是直接加入就好
細胞數對EGF刺激的結果是否有影響
因為要處理藥物加上要收western用的sample
所以種的細胞數很多 3x10^6/10 cm dish
就EGFR.pEGFR的部份
抽膜蛋白結果是否會更準確? paper上似乎都沒有提到這點
請有經驗的高手提供我一些意見了
謝謝
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