[求救] 關於 SDS-PAGE 的問題(已獲得解決)
由於最近跑western 都跑不好看，但重配所有的成分仍無法改善
因此想徵詢看看板友的意見
以下我們實驗室的SDS-PAGE成分
下膠 10% 12.5% (不同%結果仍相同)
ddH2O 4.2ml 3.2ml
30% Acrylamide-0.8%.... 4.1ml 5.1ml
1.5M Tris-Hcl pH8.8 3.0ml ''
APS(0.1g/10ml) 0.6ml ''
10% SDS 120ul ''
TEMED 10ul ''
上膠
ddH2O 2.7ml
30% Acrylamide-1.2%.... 0.7ml
0.5M Tris-Hcl pH6.8 1.3ml
APS(0.1g/10ml) 250ul
10% SDS 50ul
TEMED 10ul
上膠 100V 下膠140V (全程100V 仍無法改善)
跑出來的band 大概都是^^^^^^^^的型狀 (有點類似倒V，但沒那麼彎)
大概跑道下膠後由Dye就能看到這情況，跑完再transfer後用Ponceau S
確認過是跑膠就有的問題，因為以前用相同條件跑都沒問題，但最近怎麼跑
都是一樣的情況，我們實驗室也有跑zymography，也發生相同的問題。
想問看看是甚麼問題造成的，或是那個原始成分壞掉可能出現這種情況
希望有版友能幫忙，感謝~~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.138.38
※ 編輯: jeffsu 來自: 140.128.138.38 (05/23 16:59)
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