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[求救] Fugene, Lipo2000在Lentiviral上的效率

看板Biotech (生命科學)作者 (吸血鬼螞蟻)時間14年前 (2011/08/15 12:46), 編輯推噓7(7推 0噓 8→)
留言15則, 8人參與, 最新討論串1/1
差不多要開始採買所需的用品了 目前我在別間實驗室學的方法是用Fugene 不過我上網查了protocol很多人都是用lipo2000 我想請問一下，大家在做Lentiviral的時候 用的大部分是哪種方法阿？ 有沒有兩種方法都用過的大大可以分享一下使用效率？ （我預計使用的細胞是293FT） 阿～ 順便想要請問大家一下 大家有沒有用過 Lentiviral Packaging 的 kit 雖然貴鬆鬆～但是還請大家推薦一下 我有看到invitorgen有賣 想請問還有沒有什麼有名的大廠？ （對不起 無知的小妹我物理系出身 還請大家多幫忙 Orz） -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 211.86.156.114 ※ 編輯: bloodsuckant 來自: 211.86.156.114 (08/15 13:09)
推
08/15 15:03, , 1F
我是用最傳統的calcium phosphate方法做transfection.
08/15 15:03, 1F
推
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calcium phosphate +1
08/15 16:12, 2F
推
08/15 20:36, , 3F
293T用calcium phosphate就好囉~
08/15 20:36, 3F
推
08/16 17:50, , 4F
我也是用293FT生產Lt virus 用樓上推薦的鈣離子沉澱法
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08/16 20:18, , 5F
喔～大家都推薦鈣離子阿～我好好研究一下 謝謝大家
08/16 20:18, 5F
推
08/17 00:14, , 6F
Packaging 的 kit SBI有賣,不過要看你的lenti expression
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vector是哪裡來的吧?
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另外calcium phosphate也有commercial的~重點是細胞轉染後
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不要飄,存活率要好吧!^^"
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calcium phosphate都是自己配,買commercial也太有錢了
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推
08/18 23:40, , 11F
Fermentas Turbofect 便宜效果好 我們用在293T上
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lipo2000 Fugene等等 homemade PEI都用過了
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你說的我們家全都用過 homa-made的PEI也有
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但長時間下來多種原因考量選用的就是Turbofect
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推
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cation polymer的方法最近很多廠商在推 便宜效率高 可以考慮
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