[求救] ELISA standard curve
我是買kit直接照protocal做，
做了三次，最高濃度的吸光值越做越低... 不知道為什麼
按照protoal的步驟是這樣:
coating capture ab overnight (第一次20hr，第二次17hr，
第三次15hr，不知道到底有沒有影響?)
→ PBST wash → assay buffer 1hr (應該就是blocking)
→ PBST wash → standard ab (從500pg/mL 到 3pg/mL) 2hr
→ PBST wash → detection ab 1hr
→ PBST wash → HRP 30min
→ PBST wash → + substrate solution 15min → + stop solution
全部只有PBST是自己配的，其他都是kit
光看我的最高濃度500pg/mL 吸光值從1.17 → 0.72 → 0.34
實在是慘不忍睹... 過程都一樣 不知道到底是哪裡有問題
唯一想到的只有一開始coating time 不一樣，可這真的會差這麼多嗎...
更不用提很小的那兩個濃度 3pg, 7pg (因為原廠付的COA有做到這麼低的濃度)
blank 的吸光值都比他們高... 扣掉之後變負的...
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 118.169.74.154
※ 編輯: carnation 來自: 118.169.74.154 (08/24 19:40)
推
08/25 22:36, , 1F
08/25 22:36, 1F
→
08/25 22:37, , 2F
08/25 22:37, 2F
→
08/25 22:38, , 3F
08/25 22:38, 3F
→
08/25 22:40, , 4F
08/25 22:40, 4F
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章