[討論] 關於酵素動力學疑問（測量superoxide dismutase活性）
小弟目前依照文獻上的各項試劑濃度製備：
(1) cytochrome C : 10 μM
(2) xanthine : 60 μM
(3) xanthine oxidase : 3 mU
先以 0.05 M potassium phosphate buffer/0.1 mM EDTA作為blank
依照(1)--> (2)--> (3)順序加入 測VIS 550 nm
(interval:10 second, duration 40 min)
文獻提到要觀察到cyt C的吸光值增加速率達到 0.02/min才可以當作control rate
(範圍0.0125~0.025均可)
不過小弟嘗試結果 初始速率僅有0.001/min上下
曾經把酵素活性提高到20 mU 但結果頂多到0.002左右
另外也把xanthine濃度提高也沒辦法看到顯著的速率增加
因此受質和酵素均提高 沒辦法看到速率增加 不知道是那邊出了問題
可否請有經驗大大為小弟解惑 感激不盡!!!
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