[求救] ELISA二抗跟著一抗跑?!
有個問題想請問大家
最近在嘗試做ELISA的抗原盤
在測試時 發現沒有coating抗原的排數
結果竟然跟有coating抗原的差不多
都是跟著一抗血清的稀釋倍數在跑
就是血清稀釋倍數越低的 O.D值就越高
這是怎麼回事?? 明明沒有加抗源耶
一抗是用豬血清(10-70倍稀釋) 二抗是山羊抗豬+HRP(30000倍稀釋)
我都是用1%PBST來清洗五次 是洗不乾淨嗎??
想請問還有什麼其他可能的原因??
感謝大家!!!
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