PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

[求救] MTT assay 處理組數值高於控制組

看板Biotech (生命科學)作者 ( )時間14年前 (2011/12/29 17:15), 編輯推噓5(5推 0噓 5→)
留言10則, 6人參與, 最新討論串1/4 (看更多)
已經爬過文了沒看過有人問 請教板友 我做的試驗是在caco-2貼附後 加入某藥品進行攻毒 另外添加兩個菌數的某菌 想看該菌可否使藥品對caco-2的傷害降低 結果 control是沒加藥品也沒加菌 OD值平均視為100% 只加藥品組OD值是控制組的80% (嗯 還OK) 重點來了 只加低菌數某菌組OD值居然是control的200%!! 我想說 會不會是caco-2跟菌之間有吸附的關係 所以測MTT時也同時測到菌了 但在只加高菌數某菌組OD值是control的120% 而在藥品與菌共同treat下則都低於100% 嗚哇我該如何解釋 MTT assay結果 實驗組比control還高呢? 甚至達到200%??? 補充 1. 96-well 細胞數: 2x10^4/well 100 μl/well 2. 因為有菌的處理 反應時間設定只有12h 3. 在加入MTT之前 有用200 μl PBS wash 2次 4. triplicate, standard error挺小的 謝謝各位了~~~ ※ 編輯: unwell 來自: 140.112.154.104 (12/29 17:17)
推
12/29 17:21, , 1F
MTT 12hr會不會太少了?
12/29 17:21, 1F
→
12/29 17:27, , 2F
我是逼不得已 放到24H菌長超快細胞會死 是可以再微調看看
12/29 17:27, 2F
推
12/29 17:47, , 3F
加入MTT之前不可以用PBS wash，會把酵素洗掉
12/29 17:47, 3F
→
12/29 17:47, , 4F
很多人會犯這個錯誤
12/29 17:47, 4F
→
12/29 18:25, , 5F
MTT是加在medium裡處理細胞反應4h 不是測那4h產的酵素?
12/29 18:25, 5F
→
12/29 18:29, , 6F
如果會洗掉酵素 那吸掉medium那步時不就也吸掉酵素了???
12/29 18:29, 6F
→
12/29 18:29, , 7F
謝謝大家的回應
12/29 18:29, 7F
推
12/29 18:40, , 8F
要測的dehydrogenase在mitochondria 不會被洗掉
12/29 18:40, 8F
推
12/29 20:05, , 9F
是測MTT被mitochondria的reductase還原後變成的formazan
12/29 20:05, 9F
推
12/29 23:07, , 10F
樓上正解..請各位仔細去看MTT原理
12/29 23:07, 10F
‣ 更多 unwell 的文章
文章代碼(AID): #1E_2-Vrx (Biotech)
Biotech 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 unwell 的文章
文章代碼(AID): #1E_2-Vrx (Biotech)