Re: [求救] sample抑癌效果突然下降

看板Biotech (生命科學)作者 (冥煌 = 好硬)時間14年前 (2011/11/06 19:40), 編輯推噓1(107)
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※ 引述《FireHell (冥煌 = 好硬)》之銘言: : 我的細胞是Hep 3B : sample是一種三萜類純物質,溶解在DMSO : 平常冰-20度C,使用前會加溫到50度C (37度C不會完全溶解) : 細胞我會控制代數前後差異不超過7代 : sample已知光穩定、熱穩定(70度C沒問題) : 最近發現treat同樣的濃度、時間 : MTT的存活率從4X%上升到8X% : 請問各位高手是哪裡有問題呢? : 目前想到的是可能反覆解凍會使sample degrade : 不過我的sample是很穩定的應該還好吧? : 有時後購買一些藥會寫說不可以反覆解凍,原理是什麼呢? : 感謝回答 :) 不好意思回覆自己的文,真的是鬼打牆了 煩請各位高手幫我點出問題所在,感激不盡 我配了新的stock,保存於常溫(避免反覆解凍)、避光 舊的stock保存於-20度C,使用前加溫至50度C、避光 以同樣濃度、時間做了以下測試 (細胞代數是以我個人第一批凍起來的視為第一代計算) 舊stock treat第三代細胞 → viability = 8X% 新stock treat第三代細胞 → viability = 9X% 舊stock treat第七代細胞 → viability = 9X% 出乎意料的新stock還比較沒效一點 不過存活率這麼高,跟我之前持續數月穩定的4X%(舊stock)比起來真的差太多了 Medium是用一樣的貨號,FBS也是用一樣的"批"號(我treat時會用2% FBS medium) Incubator內的CO2濃度、水蒸氣量都正常 實在是想不到為什麼sample會突然沒效,請教各位高手,感激不盡>"< -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.98.115 ※ 編輯: FireHell 來自: 140.112.98.115 (11/06 19:41)

11/06 19:47, , 1F
會不會是之前做MTT的那管stock濃度配錯阿
11/06 19:47, 1F

11/06 19:50, , 2F
基本上不可能,因為我的sample難溶,我都配10 mM是極限了
11/06 19:50, 2F

11/06 19:51, , 3F
如果配更濃的話一定不會完全溶解
11/06 19:51, 3F

11/06 19:51, , 4F
附帶一提,我treat時的DMSO濃度都控制在0.3%
11/06 19:51, 4F

11/07 02:23, , 5F
check cell confluency b4 treatment MTT被細胞數影響頗大
11/07 02:23, 5F

11/07 02:25, , 6F
你的情形我猜是cell over confluent.
11/07 02:25, 6F

11/07 13:33, , 7F
請問樓上指的是細胞密度太高嗎?我是5000 cells/well
11/07 13:33, 7F

11/07 14:22, , 8F
microplasma? 曾經因此原因而藥效大降
11/07 14:22, 8F
文章代碼(AID): #1Ejd8wi0 (Biotech)
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