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Re: [討論] 跑WB的蛋白質樣品-20可以保存多久?

看板Biotech (生命科學)作者時間14年前 (2012/01/06 12:33), 編輯推噓5(5推 0噓 4→)
留言9則, 6人參與, 最新討論串2/2 (看更多)
-- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.77.65.129
→
01/02 01:38,
通常我放3個月就會明顯感受到訊號減弱 但有神人一年樣本
01/02 01:38
→
01/02 01:39,
跑起來還是很威 只能說看個人
01/02 01:39
推
01/02 06:56,
每一部作control試試看原因吧 最近還碰過機器壞掉的
01/02 06:56
推
01/02 11:39,
想順便請問大家,大家覺得protein用SB處理過後保存比較好,還
01/02 11:39
→
01/02 11:40,
是直接凍在-80,要跑WB前再用SB處理比較好,謝謝~
01/02 11:40
推
01/02 13:50,
SB和加熱處理後 protein都變性 而且如果有加inhibitor
01/02 13:50
請問SB洗蝦?
→
01/02 13:50,
理論上是還滿穩定的...
01/02 13:50
→
01/02 13:50,
我現在是先定量一批跑internal control
01/02 13:50
→
01/02 13:51,
如果沒變 那我就分管以sample buffer處理後冰-20
01/02 13:51
推
01/04 00:24,
有沒有一個確定的positive control可以用?
01/04 00:24
→
01/04 00:29,
另外,是只有你或是少數人做不出來,還是所有人都這樣?
01/04 00:29
→
01/04 00:30,
是的話,check一下2抗及substrate
01/04 00:30
推
01/05 03:04,
加laemmli buffer煮過之後放-70至少可以放一年
01/05 03:04
借題請問一下 1. 大家會在protein extract, quantification後 就把全部的protein加入DTT, loading dye 煮過後保存嗎? -70 or 4oC呢? 2. 另外 我們lab是用DTT和loading dye而已 請問 是否要額外加入SDS呢? 3. 我們放比較久的loading dye會有嚴重沉澱 vortex也不大能溶解 請問有什麼辦法可以解決嗎? 加熱? 謝謝大家:D -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.121.106
→
01/06 12:36, , 1F
sample buffer~
01/06 12:36, 1F
→
01/06 12:45, , 2F
1.冰-20 2.不用 3.right~Water bath or hot plate
01/06 12:45, 2F
推
01/06 13:27, , 3F
1. yes 放-70 放-20頂多放一個月就不行了
01/06 13:27, 3F
→
01/06 13:28, , 4F
2. yes lammeli buffer Tri6.8+sds+bp blue
01/06 13:28, 4F
→
01/06 13:29, , 5F
3. 加熱
01/06 13:29, 5F
推
01/06 16:20, , 6F
順便問一 下 加熱最多可以到幾度?
01/06 16:20, 6F
推
01/06 16:38, , 7F
95度 10分鐘 注意不能煮沸
01/06 16:38, 7F
推
01/06 17:35, , 8F
感謝回答!
01/06 17:35, 8F
推
01/07 09:12, , 9F
SB=sample buffer, 就那個藍藍的東西XD
01/07 09:12, 9F
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