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[問題] laminar flow抽RNA的缺點

看板Biotech (生命科學)作者 (玻璃做的大叔)時間14年前 (2012/01/14 22:18), 編輯推噓14(14推 0噓 23→)
留言37則, 15人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
之前爬文，很多人提過抽RNA不用在laminar flow內，說抽RNA需要的不是「無菌室」 而是「無塵室」，甚至認為裡面的風一直往下吹，反而有可能增加RNase接觸的機率， 我想請問的是： 1.laminar flow的HEPA+氣流循環無法擋住RNase嗎？ 2.如果不是無菌的狀況，會不會有細菌RNA之後被PCR抓出來的可能？尤其是 constant gene之類的？有時細胞量真的不夠，不曉得會不會P到細菌的。 另外，因為實驗室很小，沒法找到旁邊都沒人的角落做實驗，也不可能讓 所有人戴口罩或閉嘴，請問這樣還是不建議在laminar flow內操作嗎？ -- 太初有道，道與耶和華同在，道就是耶和華。這道太初與耶和華同在。 萬物乃藉祂所造，凡被造的沒有一樣不是藉著祂所造的。生命在祂裡頭， 這生命就是人的光。光照在黑暗裡，黑暗卻不接受光。 吾輩乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦誘惑，回歸黑暗。 我不斷地徘徊於光明與黑暗之間，從被造之日至今，又自今直到那審判之日的來臨。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 180.176.44.154
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01/14 22:53, , 1F
2.那個落菌量微乎其微啊，細胞量隨便都至少10^3以上吧
01/14 22:53, 1F
推
01/14 23:18, , 2F
我們實驗室也很小很擠，還是可以抽啊
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01/14 23:18, , 3F
不過，因為有用有機溶劑，所以我必須在 hood 操作
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至於其他用 kit 的人，跟抽plasmid的用具共用也沒有問題
01/14 23:19, 4F
推
01/15 00:21, , 5F
建議還是用。用之前用 RNaseZAP 擦過，使用時不開風。
01/15 00:21, 5F
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01/15 01:14, , 6F
其實bench上就ok耶 冰上自己小心就好 有機還是要進hood
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推
01/15 01:14, , 7F
你就戴好手套口罩，在bench上好好抽一次RNA
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如果不會降解的話，以後就在bench上抽就好了
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01/15 01:15, , 9F
我大概也用TRIzol抽了幾十次RNA，都在bench上也沒事啊
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推
01/15 02:16, , 10F
氯仿會揮發 在hood內做!
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推
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我們有一個無循環的櫃子抽 或許你可以關掉blower
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推
01/15 02:59, , 12F
現在有不用氯仿的RNAzol，應該有幫助
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推
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RNAzol 推薦 +1
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01/15 22:07, , 14F
flow是往下吹，hood是往上吸，哪種比較好啊？我學長是點兩瓶
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01/15 22:08, , 15F
酒精燈操作的，說熱氣流可以避免上方髒東西掉入...
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推
01/15 22:19, , 16F
在專門做RNA的lab待過一陣子,直接在bench上操作就夠了~
01/15 22:19, 16F
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手套跟口罩隨時帶著,就夠了~
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01/15 22:24, , 18F
RNAzol很貴啊，而且對植物實在沒輒
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01/15 22:25, , 19F
就算沒有氯仿，光是reagent本身就有揮發性的有機溶劑啊
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戴個口罩保護樣本也稍微保護自己，在hood是保護大家
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推
01/15 23:46, , 21F
氣流向下的應該是生物安全櫃，化學排氣櫃氣流向上哪~
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TRIZol裡面有phenol，後來又要加哥羅芳，所以才在排氣櫃
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不然我都在路邊亂抽，動作快點就也還好。
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我那點酒精燈的學長倒真的是在路邊抽就是了，當然還是會叫我
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們離遠一點，還有別亂嘴砲XD。
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不過現在這個實驗室人擠來擠去，要清場很困難。
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推
01/16 09:08, , 27F
動作快是唯一的準則。快˙狠˙準！
01/16 09:08, 27F
推
01/16 17:19, , 28F
可是有有機溶劑還用酒精燈也太刺激了 xDD
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01/17 16:21, , 29F
Trizol和chloroform都很毒...本來protocol就寫在hood做...
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01/21 23:11, , 30F
可是我們家的hood很髒啊，離離心機又遠，囧
01/21 23:11, 30F
推
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我們實驗室定期用0.1%DEPC噴flow
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樓上！是用沒高溫滅菌的噴？
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推
01/22 13:08, , 33F
DEPC有毒的說...
01/22 13:08, 33F
推
01/22 14:27, , 34F
DEPC....你們實驗室....讚喔!! 百毒不侵@@
01/22 14:27, 34F
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01/23 01:20, , 35F
DEPC..超毒的啊..你哪間實驗室..大家離遠些..!!!
01/23 01:20, 35F
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01/23 08:37, , 36F
之前爬文就有看到一篇老闆堅持要用DEPC清洗不能高溫滅菌器材
01/23 08:37, 36F
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01/23 08:38, , 37F
的實驗室，不曉得mayjasty是不是同一間？
01/23 08:38, 37F
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