Re: [求救] 抽DNA 急急急...

看板Biotech (生命科學)作者 (Jia Hung)時間13年前 (2012/06/04 09:43), 編輯推噓5(509)
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體積我確定是沒有問題的 但是到現在我還是不知道該怎樣提高我的A230數值 CTAB的方法好像沒有甚麼效果 -- 總算找到自己想要努力的目標 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 117.56.249.127

06/04 10:35, , 1F
不知道你有沒有聽過一個叫pine tree的抽法?可以試試唷
06/04 10:35, 1F

06/04 21:00, , 2F
根據以前要打槍業務的經驗. R牌260/230高到爆表. G牌適中
06/04 21:00, 2F

06/04 21:01, , 3F
然後Q牌過低 可是用螢光及qPCR定量的時候, Q牌量>R>G
06/04 21:01, 3F

06/04 22:54, , 4F
回答以上 spin column裡的membrane有個celluse的成分
06/04 22:54, 4F

06/04 22:56, , 5F
可能會在運送過程中粉屑掉落或者在實驗過程中掉落
06/04 22:56, 5F

06/04 22:57, , 6F
因此一般會造成吸光值假陽性偏高的部分 也是為什麼
06/04 22:57, 6F

06/04 22:57, , 7F
大牌子有其特殊 以及給使用者保證品質的地方
06/04 22:57, 7F

06/04 22:58, , 8F
另外cellues除了假陽性以外 還會抑制下游PCR反應
06/04 22:58, 8F

06/05 01:01, , 9F
樓上說的好, 像是Q牌RLT buffer會造成RNA在吸光值230的異常
06/05 01:01, 9F

06/05 01:02, , 10F
所以建議原po可以在wash的階段,在column加buffer後上下翻轉
06/05 01:02, 10F

06/05 01:03, , 11F
讓buffer確實洗淨管壁殘留.我試過RNeasy有效啦.DNeasy沒試
06/05 01:03, 11F

06/05 17:07, , 12F
樓上的經驗好像似曾相似.......
06/05 17:07, 12F

06/05 18:23, , 13F
樓上的懷疑是對的.. XD 不過第二part是現在這邊發生的>///<
06/05 18:23, 13F

06/06 09:45, , 14F
原來還有第二階段~不過Q牌的穩定性是真的還不錯
06/06 09:45, 14F
文章代碼(AID): #1Fp1B4N0 (Biotech)
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