[求救] Western blot

看板Biotech (生命科學)作者時間13年前 (2012/09/25 13:34), 編輯推噓5(505)
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不知道為什麼 跑western 壓actin都會有類似下面這張圖的現象 http://tinyurl.com/d6b2pjp 有人可以救救我嗎? 用麗春紅染色都看不到這些現象 用冷光儀拍都會有這種現象 就是反白 而且很怪的反白 因為有時候是整個band都是白的 有時候卻是一半是白的~一半是正常 很詭異!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.139.11

09/25 14:21, , 1F
曝光久一點
09/25 14:21, 1F

09/25 17:41, , 2F
定量不是看第一張圖嗎?
09/25 17:41, 2F

09/25 17:59, , 3F
就算後面愈來愈黑.. 定量不是看顏色和外框嗎?
09/25 17:59, 3F

09/25 19:13, , 4F
actin量多,使ECL很快就反應掉了,可試試減少抗體濃度~
09/25 19:13, 4F

09/27 17:05, , 5F
一開始就白底黑bands嗎?上面其他protein可以放同一張拍嗎?
09/27 17:05, 5F

09/28 01:28, , 6F
二抗稀釋多少? 可能可以再稀一些 有類似的狀況過
09/28 01:28, 6F

09/28 09:56, , 7F
2抗 1:100000
09/28 09:56, 7F

09/29 18:50, , 8F
1:100000!? 哪一家的2抗這麼濃@@
09/29 18:50, 8F

09/29 18:51, , 9F
我用cell signaling的都是1:5000 (RM都是)
09/29 18:51, 9F

10/03 17:43, , 10F
actin太強燒掉了,一抗1:10000室溫十分鐘就好,二抗也差不多
10/03 17:43, 10F
文章代碼(AID): #1GOK9LSb (Biotech)
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