Re: [求救] Sorbitol的功能?

看板Biotech (生命科學)作者 (雷米亞茲)時間13年前 (2012/10/12 21:22), 編輯推噓4(403)
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※ 引述《kobeiloveyou (我超強暴)》之銘言: : 大家好 : 在抽酵母菌DNA時 : 有的方法會在破菌的buffer加入sorbitol : 想請問加sorbitol的功能是? : 是維持滲透壓嗎? 但抽DNA都要破菌了 還維持滲透壓做什麼 : 希望有人可以幫我解答 謝謝!! 加sorbitol就是要維持滲透壓 你這方法應該是要配合Zymolase先分解細胞壁 等細胞壁被分解後 離心沉澱原生質 去上清後 再利用含detergent的buffer將細胞打破 如此可以取得量多質優的genomic DNA 所以在分解細胞壁那步驟時 buffer中要含有高濃度的sorbitol (1 M) 這樣細胞膜才不會先漲破 希望有回答你的疑問 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.171.120.108

10/12 21:36, , 1F
謝謝!!那細胞膜再破細胞壁那步驟先漲破 DNA會怎樣嗎?
10/12 21:36, 1F

10/12 21:43, , 2F
之後不是也要破膜,分解細胞壁時也能破膜不是比較好
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Lysis buffer通常體積比較大,如果直接讓DNA跑出來,
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那DNA濃度不就變稀了?
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更何況Lysis buffer的環境不適合溶DNA
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10/12 21:52, , 6F
瞭解了謝謝!
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