Re: [求救] IVIS CONSTRUCT 細胞螢光表現強度不一
※ 引述《isketo (isketo)》之銘言:
: ※ 引述《vancent (新的鄉民XD)》之銘言:
: : 如題~
: : 小弟手邊有兩種癌細胞(一個為PARENTAL 一個為加藥處理過的PARENTAL細胞)
: : 現在想要以IV注射 以IVIS系統觀察META情況
: : 但遇到一個問題~就是兩株細胞的螢光表現強度差很多
: : 一株二十幾萬一株三十幾萬
: : 以SORTING框選不同強度的細胞皆無法將螢光強度調整至一致
: : 想請問這樣的情況各位版友有沒有遇過?
: : 有什麼樣的解決方式呢? 是在TRANSFECT的時候UPTAKE的PLASMID量就有差異?
: : 先謝過各位版友:)
: : PS 加藥過的細胞已TRAIN成SUBLINE~無法以IN VIVO形式做餵食
: 改以冷光追蹤應該會比較優
: 冷光可以絕對定量!
或是改以螢光增加的百分比表示!
兩株各自以一開始的螢光表現為1.0
幾週之後,兩株各自增減的螢光(分子)除以一開始的表現(分母)作為校正
最後以比值或是百分比表示
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