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Re: [求救] Rat cortical neuron 培養

看板Biotech (生命科學)作者 (可找我下棋..)時間13年前 (2012/11/15 15:03), 編輯推噓3(3推 0噓 9→)
留言12則, 3人參與, 最新討論串2/3 (看更多)
※ 引述《kattyhouse (kat)》之銘言： : 因為實驗室剛開始做cortical neuron的primary culture... : 所以想跟版上前輩們請教 : 是取出生24hr內SD Rat 的cortex 使成為 single cell : 再利用DMEM/F12+10% FBS 培養24hr後 : 才換成DMEM/F12+B27+Ara-C (10uM) : 並且會另外添加鉀離子(K+)使Medium中的鉀是20-30mM : culture在PDL(poly-D-lysine) coating 的coverslip上 (cell density是2X10^5) : 但是細胞會在1週內死亡 : (4-5天會有morphology的change會有細胞空洞並且有凋亡的現象) : 但一般都可以培養2week以上... : 請問有前輩知道是哪裡有做錯的地方嗎?? : 謝謝 primary neuron請取懷孕16-18天的胎鼠 純度高又好養! medium用neurobasal+B27 -- 單身不代表寂寞，寂寞是走在一個不愛妳的人身邊的時候。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.253.72
推
11/15 21:23, , 1F
不過因為成本考量及我同學他不敢(想)剖腹所以就沒有辦
11/15 21:23, 1F
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11/15 21:24, , 2F
法用你的方法做耶~不過我不清楚16-18天跟出生後的老鼠
11/15 21:24, 2F
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11/15 21:25, , 3F
有很大的差別嗎? 謝謝你喔~ 但neurobasal是liquid的培
11/15 21:25, 3F
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11/15 21:26, , 4F
養液~想請問您有買過powder的嗎? 謝謝~
11/15 21:26, 4F
推
11/16 00:54, , 5F
我們實驗室也有做耶 也是用胎鼠哦
11/16 00:54, 5F
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11/16 00:55, , 6F
不過我記得弄成SINGLE CELL的過程蠻重要的
11/16 00:55, 6F
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11/16 00:57, , 7F
另外neurobasal + b27無誤~
11/16 00:57, 7F
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11/16 12:16, , 8F
P1或p2的neuron culture大部份都是astrocyte
11/16 12:16, 8F
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11/16 12:16, , 9F
E16-E18的neuron80%以上是neuron
11/16 12:16, 9F
推
11/16 16:36, , 10F
所以是直接打成single cell就直接種在neurobasal+B27中
11/16 16:36, 10F
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11/16 16:37, , 11F
也不用加ara-C或其他的東西之類的嗎?
11/16 16:37, 11F
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11/16 16:38, , 12F
還是仍然要在含有FBS的貼24hr後才換成neurobasal+B27
11/16 16:38, 12F
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