Re: [求救] 真菌子實體DNA萃取
※ 引述《stormcorn (0是)》之銘言：
: ※ 引述《YuDavid (討厭失眠)》之銘言：
: : 大家好
: : 一些算是技術上面的問題想請教大家
: : 是關於DNA extraction的
: : 之前我抽取的樣本大多是動物或細菌
: : 最近學姊突然搞到牛樟芝子實體說要做一點實驗
: : 可是我沒有抽過真菌 查了一些資料 好像說子實體很難抽
: : 主要是最一開始的細胞破碎/裂解的部份有點困難
: : 不知版上是否有在做真菌的先進可以傳授點經驗
: : 而且我沒有查到for yeast dna extraction的kit
: : 還是說我們之後是直接跑pcr
: : 有什麼物理方法或類似煮沸法
: : 然後直接拿去pp看
: : 類似細菌的菌液pcr
: : 不知道真菌這樣行得通嗎＠＠
: : 不曉得能否給我一些建議呢 謝謝各位！
: 1.冷凍乾燥你的真菌樣本
: 2.液態氮研磨你的凍乾真菌樣本
: 3.粉末狀態下, 秤取你要的克數, 其餘用樣本瓶低溫保存
: 4.加入DNA LYSIS BUFFER (破植物的也可以 主要是細胞壁)65度煮過的方法最好
: 5.接下來就一般的DNA萃取法
: 參考來源:主修真菌的自己
我之前是做類似牛樟芝的硬菇類
我的作法是先從子實體切下活性較高的部份 通常是最外緣 顏色較淺處
需剪開取內部組織否則表面很多雜質 切越細越好
取約1.5tube一半的量後把tube直接丟到裝液態氮的桶子裡脆化
然後火速利用高速震盪細胞破碎儀震成粉末狀
接著照一般的DNA抽取kit做就可了
ps若沒有破碎機可以像樓上那樣倒液態氮下去磨 小心很會噴就是了
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.29.233
討論串 (同標題文章)
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章