PTT職涯區 / Biotech (生命科學)

[求救]請問繼代細胞方法

看板Biotech (生命科學)作者 (玩具)時間12年前 (2013/09/18 14:25), 編輯推噓8(8推 0噓 4→)
留言12則, 8人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
想請問大家 繼代細胞時 有遇過重新回溶細胞 有打不散的情形嗎 目前養的是 embryonic stem cell 所以下面有層feeder 用trypsin 作用4分鐘 之後 中和 離心 重新用medium回溶 但是 光用塑膠pipette 回溶 是沒辦法完全回溶 就還是有些細胞團塊 打不散 在懷疑是不是feeder也跟著起來 但是dish的feeder都還在 也試過將團塊沉澱下來 但這樣細胞量 真的不太準 想請問看看 是否還有其他方式 可以打散團塊 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.67.246
推
09/18 17:29, , 1F
Trypsin完後先用巴斯德管打一下在加medium中和試試看
09/18 17:29, 1F
推
09/18 19:34, , 2F
我以為ESC都是用scratch養 = =a
09/18 19:34, 2F
推
09/18 19:40, , 3F
加少量medium (1 cc),用1 cc Pipette打散
09/18 19:40, 3F
推
09/18 19:50, , 4F
用2cc serological pipette 將細胞團塊刮下
09/18 19:50, 4F
可以用刮的喔
→
09/18 19:51, , 5F
繼代培養ES cell應該不建議將細胞將細胞打散成single cell吧?
09/18 19:51, 5F
的確不能打成single 但剛開始練習 老闆說先把大團的打小 single也沒關係
推
09/18 19:57, , 6F
將trypsin離心去掉上清液後~先敲敲管子或刮刮racker~
09/18 19:57, 6F
※ 編輯: jkq 來自: 114.46.156.131 (09/18 20:36) ※ 編輯: jkq 來自: 114.46.156.131 (09/18 20:38)
推
09/19 16:05, , 7F
stem cell不就是要一團一團的passage嗎???@@
09/19 16:05, 7F
→
09/19 16:06, , 8F
要練習拿HEK練習最好
09/19 16:06, 8F
一團一團是沒錯 但會變的大小不一 pa的時間點就難抓 ※ 編輯: jkq 來自: 221.120.65.20 (09/19 21:14)
推
09/20 22:05, , 9F
ES要用割的！
09/20 22:05, 9F
推
09/20 22:31, , 10F
繼代就不是single cell的方式 練習打成single cell的目
09/20 22:31, 10F
→
09/20 22:31, , 11F
的是？ 你應該是練習打成小團就可以了
09/20 22:31, 11F
→
09/20 22:33, , 12F
而且用塑膠pipette打不散是正常的吧
09/20 22:33, 12F
‣ 更多 jkq 的文章
文章代碼(AID): #1IEKTKiZ (Biotech)
討論串 (同標題文章)
完整討論串 (本文為第 1 之 2 篇)：
排序： 最新先 | 最舊先 | 留言數
在新視窗開啟完整討論串 (共2篇)
Biotech 近期熱門文章
更多 近期熱門文章 >>
PTT職涯區 即時熱門文章
更多 即時熱門文章 >>
‣ 更多 jkq 的文章
文章代碼(AID): #1IEKTKiZ (Biotech)