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[求救] NEB跟Thermo的RE是可共用buffer

看板Biotech (生命科學)作者時間11年前 (2014/03/14 11:47), 編輯推噓0(0推 0噓 8→)
留言8則, 2人參與, 最新討論串1/1
手上有NEB的SpeI和fermentas的HindIII (都是普通版本，非FD、非HF) 現在要做double digestion，但是RE的廠牌不同... 我查fermentas的SpeI用Tango buffer可以有100%活性 如果用NEB的SpeI加進Tango buffer，和HindIII一起切，這樣行得通嗎？ 由於實驗室窮到爆炸，買enzyme應該是下下策，求有經驗的前輩幫忙解惑... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 60.251.145.32
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03/14 12:52, , 1F
你的第3行,NEB的HindIII在buffer2也有100%,不也可以反過來?
03/14 12:52, 1F
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03/14 13:07, , 2F
通常結論都會是"分開切",不過如果要試,SpeI在buffer2是100%
03/14 13:07, 2F
這實驗室gel elute kit剩下的數量...不容許我做這件事 ...
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03/14 13:09, , 3F
而且F的HindIII在R(tango反而不好)是100%,R與2是最靠近的
03/14 13:09, 3F
沒NEB 2，只有Cutsmart buffer(4+BSA的版本)(整間實驗室只有一支NEB的enzyme...) 別的實驗室很遙遠，借buffer來回要兩小時...所以先考慮Fermentas的去弄 而且HIndIII很便宜，-20C裡面還有不少，所以才會想以配合SpeI為主
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03/14 13:11, , 4F
不過實驗室真的有經費考量,還是別亂試比較保險
03/14 13:11, 4F
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03/14 13:20, , 5F
我以前實驗室是 NEB 和 Roche，基本上是相容的。
03/14 13:20, 5F
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03/14 13:21, , 6F
NEB 有提供 Buffer 的配方，如果 Thermo 也有提供，你可
03/14 13:21, 6F
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03/14 13:22, , 7F
以去比對看配方是不是類似的，如果是類似的當然可以共用
03/14 13:22, 7F
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03/14 13:23, , 8F
如果你想保險起見，就先拿少量做個測試吧！
03/14 13:23, 8F
謝謝，我先試少量跑膠看看好了 ※ 編輯: tigernaxo 來自: 60.251.145.32 (03/14 14:15)
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