[求救] 關於stem loop RT 的專一性

看板Biotech (生命科學)作者goodday06 (goodday)時間11年前 (2014/04/24 21:42)推噓1(1推 0噓 0→)

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發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出以方便板友幫您追蹤問題若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，請務必註明貴實驗室願意設立正式合作或簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪除 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 小弟最近在接觸miRNA 相關題材的題目想請教stem-loop RT、PCR 專一性的問題假設reaction A miR、primer能順利進行RT : 某miR ......AUAUCGUG-3' |||||||| ----> RT 某stem-loop primer TATAGCAC-stem-loop 那麼reaction B miR 末端多出一個base 的組合能否進行RT?: 某mir ......AUAUCGUGA-3' ||||||||X -----> RT? TATAGCAC-stem-loop 下面三個類似的問題: 上面的例子中，Reaction B 是否無法進行RT? stem-loop primer 有專一性從RNA 或是miR 3'端黏合嗎? stem-loop 有阻礙primer 隨機黏合於RNA 或miR 其他位置，而達到專一黏合於3' 端的功效嗎? 先感謝分享指教! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.32.9 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1398346973.A.63B.html ※ 編輯: goodday06 (140.109.32.9), 04/24/2014 21:44:03