[求救] SDS-page 底下一條線分不開

看板Biotech (生命科學)作者 (比幣)時間11年前 (2014/05/06 22:06), 11年前編輯推噓4(406)
留言10則, 6人參與, 最新討論串1/1
最近我們實驗室配出來的page最底下都會有一條線,導致下面的band都看不清楚 ↓這是以前跑的正常的page http://ppt.cc/gQY8 http://ppt.cc/lFi7 ↓這是最近跑出來的page http://ppt.cc/8t~0 http://ppt.cc/XNJd 照理說那條線在綠色的marker跑到剩1/10左右他就要跑到底了 但是現在他都一直跟marker在同一個水平 跑的條件都沒變所以應該不是電壓電流或配方的問題 我們acrylamide、APS、TRIS都有重配過,但是還是沒有回復正常 請問還有可能是甚麼問題啊?謝謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 36.226.228.44 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1399385205.A.30A.html

05/06 23:17, , 1F
gel %是不是不一樣?
05/06 23:17, 1F
gel都是配15%的

05/06 23:23, , 2F
loading Dye?
05/06 23:23, 2F
dye倒是沒重配...

05/06 23:33, , 3F
白金絲看有沒有鏽掉 換tank看看
05/06 23:33, 3F
tank有兩個 不過應該不會那麼巧所有人都一直拿到同一個吧@@ 不然就只好兩台一起用 不然分不出來QQ ※ 編輯: windcloud27 (36.226.228.44), 05/07/2014 01:12:09

05/07 02:01, , 4F
光用protein Ladder來比的話, gel%似乎改變了
05/07 02:01, 4F

05/07 02:03, , 5F
現在的比較像10-12%的
05/07 02:03, 5F
阿...其實我這幾張是不同人跑的,時間會有點不一樣 但是我突然想到我們acrylamide是用40%稀釋的,不知道會不會配得人稀釋過頭了 ※ 編輯: windcloud27 (36.226.228.44), 05/07/2014 03:49:17 突然想到還有很奇怪的一點是那條線似乎也會蓋到marker那欄well去? 有人跑過中間空很多格well 跑完之後那條線還是會全部都會有 ※ 編輯: windcloud27 (36.226.228.44), 05/07/2014 03:52:36

05/07 07:04, , 6F
如果做膠時沒凝好 上下膠交界太多水的話 跑到那邊會漫開
05/07 07:04, 6F
應該不是喔 我有試過下層凝完還去把液體吹掉 也是失敗 ※ 編輯: windcloud27 (36.226.228.44), 05/07/2014 17:21:48

05/09 13:54, , 7F
tris8.8的ph值如果不對會影響
05/09 13:54, 7F

05/09 13:55, , 8F
我的經驗是偏鹼分太開 偏酸分不開
05/09 13:55, 8F

05/11 03:07, , 9F
DTT?
05/11 03:07, 9F
日前重配了Acrylamide似乎沒有改善 老闆說要直接買新的Acrylamide dye的部分也打算要重配了 現在是先看看找以前用剩的dye看會不會有問題 另外印度人博班說試試用Urea取代dye看看會不會改善 ※ 編輯: windcloud27 (36.226.228.201), 05/13/2014 10:11:36

05/13 12:45, , 10F
你們是40%自己先配好15% pre-mix喔?
05/13 12:45, 10F
我們是40%稀釋成30%冰著 然後配的時候再按比例配成15% ※ 編輯: windcloud27 (220.129.18.14), 05/15/2014 03:35:50
文章代碼(AID): #1JQEnrCA (Biotech)
文章代碼(AID): #1JQEnrCA (Biotech)