[討論] protein-protein interaction研究方法
各位版友大家好，想請教一個關於研究protein-protein interaction的想法。
我的疑問是這樣的，我推測A protein是一個hydroxylase，
然後我想知道A protein是否與EGFR相互結合(目前尚不論A是否hydroxylate EGFR)，
當然，最一開始的想法就是用IP來證明。
但從我的實驗結果，我並沒有看到A與EGFR的direct interaction，
反倒是當我用mutant A protein(將活性部位突變，使其失去活性)時，
才看到有EGFR的結合。
我不能否認此突變，也許反而造成A與EGFR的結合，但從另一個角度思考，是否因為A與
EGFR結合作用的反應相當快速，因此很難從wild type的A直接看到與EGFR的結合。若真是
如此，還有什麼其他的法法可以解決我的疑問呢?
我目前的想法是，第一，我不用突變的方式來抑制A的活性，因為這樣也許會使其結構產
生改變，我改用hydroxylase inhibitor來處理細胞，將兩者結合之後，抑制接下來的
hydroxylation。第二，直接做Mass spectrometry，偵測EGFR是否被hydroxylation。
如果有版友有類似的實驗經驗，希望可以給我一些意見，謝謝大家!!
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 95.117.101.206
※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1399848681.A.C32.html
推
05/12 07:57, , 1F
05/12 07:57, 1F
推
05/12 09:42, , 2F
05/12 09:42, 2F
→
05/12 11:14, , 3F
05/12 11:14, 3F
→
05/12 11:54, , 4F
05/12 11:54, 4F
→
05/12 11:56, , 5F
05/12 11:56, 5F
推
05/14 23:52, , 6F
05/14 23:52, 6F
推
05/15 04:21, , 7F
05/15 04:21, 7F
推
05/29 12:11, , 8F
05/29 12:11, 8F
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章
11
36