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[求救] 蛋白質純化(BL21)

看板Biotech (生命科學)作者 (太人生了)時間11年前 (2014/05/16 00:16), 編輯推噓3(3推 0噓 4→)
留言7則, 6人參與, 最新討論串1/1
大家好 小弟我用BL21 pET24a insert一段12.1Kb的蛋白進去 在做小量50ml,測試條件pretest的時候, 蛋白超粗超厚 做完wertern也確定是his-tag 之後做大量養1L時候, 蛋白就產量不高, 越來越淡 是我的菌不純嗎...還是... 感謝... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 42.71.185.231 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1400170574.A.8CD.html
推
05/16 01:00, , 1F
shaker的轉速(或是要叫'扭力？')，也要跟著體積放大！
05/16 01:00, 1F
→
05/16 01:01, , 2F
否則空氣不夠，就會長不好~
05/16 01:01, 2F
推
05/16 01:49, , 3F
發酵的做法 跟小量的做法不一樣 當然會變低
05/16 01:49, 3F
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05/17 01:08, , 4F
轉度跟搖瓶大小都可能有關唷
05/17 01:08, 4F
推
05/17 04:38, , 5F
菌夠多嗎? 養的菌是第一代還是挑菌再塗盤第N代
05/17 04:38, 5F
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05/18 10:05, , 6F
蛋白產量不高是指整體還是上清液的soluble不多??
05/18 10:05, 6F
→
05/18 22:31, , 7F
破菌完全不完全也會影響，曾改用French press破菌，產量增加
05/18 22:31, 7F
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