[求救] 關於PCR的問題
我到實驗室之後接手了一種KO mice,
之前學姊在處理這種老鼠的genotype鑑定上就常常出現問題,
到我手上也是只要當genomic DNA濃度一不在範圍內就會跑不出來,
甚至就連當要load sample的膠放進去1X TBE裡面, 只要蓋過膠就有可能跑不出來,
最扯的就是當sample一多換成小齒梳, 就更有可能跑不出來;
今天又出現了我無法處理的狀況,
明明prositive control我已經做出好幾次是heterozygous的結果,
但是今天一整個翻盤耶=_= 為了避免又smear,
我用了兩組positive control,
結果一組在WT的地方沒東西, MU的地方卻有東西,
第二組卻都有跑出來, 而且band都很清楚,
我想請問這到底是什麼問題?!
我覺得我已經快要被這種transgenic mice給搞瘋了-..-
每次genotyping都要拖好久, 從來沒有爽快結束過FK,
我曾想過會不會是primer stock濃度出現問題所以才造成這種結果......
因為之前有一陣子WT就是死都跑不出來=_=
請問有人有類似經驗嗎?
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