[求救] 細胞用100%EtOH固定上flow
大家好，我最近第一次用EtOH固定細胞上flow，但上機時卻找不到細胞@@
步驟:
1.把細胞打起來
2.用100% EtOH 在 4'C固定O/N
3.用PBS洗兩次
4.染抗體，上flow
活細胞的FSC/SSC:(右下角有一大群細胞)
http://imgur.com/aLUXS0h,qzYlaoc#1
固定的細胞FSC/SSC:(右下角沒細胞@@)
http://imgur.com/aLUXS0h,qzYlaoc
離心完的pellet明顯小很多，不知道沒離下來，還是細胞縮水@@?
上機後調FSC和SSC也找不太到主要的細胞群
1. 請問我的做法有什麼問題嗎? 還是只是我flow的電壓沒調對?(會跟沒固定時的設定差
很多嗎?)
2. 固定後細胞型態會差很多嗎?
謝謝
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