[閒聊] 關於生物冷光鼠的定量方法

看板Biotech (生命科學)作者michaelhsien (MichaelHsien)時間11年前 (2014/06/17 18:46)推噓1(1推 0噓 1→)

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最近實驗室想要玩玩螢光酵素的生物冷光小鼠實驗 (luciferase, bioluminescence mice) 經過定量、套圖後，就像是 http://ppt.cc/PUUb 這種圖片 (參考於Shane Massey. et al, frontiers Microbiology; http://ppt.cc/AWIk) 於是我建立了穩定表現Luciferase的細胞然後我發現，其實一般在拍Western blot的機台 (GE LAS-4000) 就可以拍到細胞液發光的樣子 (Luc.細胞液 + substrate 混合後，load到96孔白盤中照相其實在暗一點的地方，就可以肉眼觀察到它發出微微的光) 所以我想... 用平常在拍WB的方式，最後一樣存成16bit的TIF檔再利用ImageQuant等軟體進行定量 (比較周圍訊號強度即可) 但是，ImageQuant只能算出在框選區域中所有的訊號是否有軟體可判讀框選區中，訊號分布的強弱? 甚至可以將定量出來的訊號強度，套成各種顏色 (就像是文中最上面老鼠那般，弱=藍，中=黃，強=紅，的訊號) 雖然很多相關文章裡面都有說明，他們顯像所用的機器但是我想是否可利用現有機器，DIY出類似的效果... 當然... 我覺得可以把它分成許多小格去定量後再依照結果將它填上不同顏色但是這樣好像很血汗阿 orz!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 120.126.57.138 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1403001974.A.2D7.html