[求救] DGGE 鑄膠有氣泡

看板Biotech (生命科學)作者 (我想我需要幸運女神...)時間11年前 (2014/07/16 16:44), 編輯推噓2(209)
留言11則, 4人參與, 最新討論串1/1
請問各位有鑄大片膠 (SDS PAGE) 的先進 小弟跑的是 DGGE 鑄膠時也確認沒氣泡 預混液也有預先離心讓氣泡不見 但是一旦放進 buffer 裡面預跑 5~60度 泡一泡就發現會有大顆氣泡產生 還有遇過整個開花像蚯蚓狀的花紋 這樣的狀況是因為 漏膠? (這次是鑄垂直膠 因為用水試的時候發現有漏一點 有另外用長尾夾幫助固定 後來就ok 不過真正鑄膠的時候還是有漏一點) 或者玻璃沒洗乾淨呢? 還是有其他問題 比方說.... acrylamide 等等的預混液過濾的不夠乾淨 顆粒太大 degas 不夠久?之類的 APS & temed 是沒有在過濾的吧 冏rz -- 原po 是孤僻兼自我感覺良好的 胖子 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.69.130 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1405500264.A.7E4.html

07/16 22:19, , 1F
窘! 我們LAB做都沒有degas這步驟,會不會是在跑電泳時
07/16 22:19, 1F

07/16 22:19, , 2F
膠片滑下拉扯的呢? 我們的玻璃也都感覺白白的洗不掉
07/16 22:19, 2F

07/16 22:20, , 3F
有洗乾淨但是也不算是完全透亮的玻璃,正常可以跑
07/16 22:20, 3F

07/17 12:48, , 4F
做過2D大片膠,沒degas,頂多注膠時有敲擊桌面,使氣泡上浮
07/17 12:48, 4F

07/17 19:58, , 5F
我以前做2D 也不用 但是 DGGE 大概因為有加尿素
07/17 19:58, 5F

07/17 19:59, , 6F
怕溶解不完全 所以還多了過濾跟 degas...
07/17 19:59, 6F

07/17 19:59, , 7F
目前是要把預混液 degas後再試
07/17 19:59, 7F

07/22 14:45, , 8F
玻璃沒洗乾淨 APS不新鮮
07/22 14:45, 8F

07/25 11:10, , 9F
昨天晚上跑看起來還ok 早上來就大開花 快昏倒了 XD
07/25 11:10, 9F

07/25 11:12, , 10F
洗玻璃我都有洗到 嚕出聲音 然後用酒精擦阿~~orz
07/25 11:12, 10F

07/25 11:13, , 11F
莫非是 APS 太古老 @@? 2006買的
07/25 11:13, 11F
文章代碼(AID): #1JnZjeVa (Biotech)
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