[討論] 有關reagent配製的"倫理"

看板Biotech (生命科學)作者 (Struggling)時間11年前 (2014/07/17 21:21), 編輯推噓4(4028)
留言32則, 11人參與, 最新討論串1/1
標題實在不知道怎麼下, 請各位大大見諒. 今天發現一件讓我很崩潰的事情... 今天去別家實驗室發現有人做E.coli cell lysis所用的 DNaseI, Lysozyme是直接用 藥杓"取一點"然後直接加入要做cell lysis的solution 中反應. 我聽了很震撼, 因為他們家不只一人這樣, 據說是向同一個學姊學的方法. 我覺得如果是剛進lab的freshman真的是別人怎麼教就會怎麼做, 我可以理解... 後來我回到lab忍不住跟同事聊起這件事, 同事跟我說"我也是這樣耶..." 我當下想變身成余天抱著頭說"我快崩潰了~我快崩潰了~!!! 後來我終於從土石堆中爬了出來, 我在想是不是我老古板了, 原來破E.coli已經演化到 可以這樣做我還不知道, 還在自以為是"崩潰"? DNaseI, Lysozyme好像是"相較"非常便 宜的東西,便宜到可以這樣用了? 是不是實驗可以做出來, protein可以純>90%出來就好? 我常常嘴砲說"實驗可以做出來就好", 現在我開始這句話是不是大有問題? Anyway, 我想reagent配成stock, 依據實驗的需要來使用正確的濃度/量是不爭的事實. 但是我還是希望有人可以提出對這件事情更深層的見解. 謝謝 -- Sent from my iPenis -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.109.64.129 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1405603290.A.548.html

07/17 21:53, , 1F
然後等連鎖汙染後再推給歷史共業XD
07/17 21:53, 1F

07/17 23:42, , 2F
不知道你覺得DNaseI, Lysozyme配合stock的儲存期可多久?
07/17 23:42, 2F

07/17 23:53, , 3F
應該不是探討要不要先配成stock,而是有沒有依照用量添加吧
07/17 23:53, 3F

07/18 09:31, , 4F
Sigma lysozyme's storage and stability
07/18 09:31, 4F

07/18 09:31, , 5F
The product, as supplied, should be stored at –20
07/18 09:31, 5F

07/18 09:33, , 6F
C, it retains activity for at least 4 years.
07/18 09:33, 6F

07/18 09:45, , 7F
哈!我在美國整個系都用這招 哈哈
07/18 09:45, 7F

07/18 15:30, , 8F
不是應該稀釋然後分裝用嗎@@?
07/18 15:30, 8F

07/18 15:30, , 9F
原PO是指其他人都直接取母液?
07/18 15:30, 9F

07/18 15:43, , 10F
原po應該是指直接取powder...
07/18 15:43, 10F

07/18 17:26, , 11F
podwer
07/18 17:26, 11F

07/18 23:08, , 12F
照用量添加的話直接配在solution裡會比配stock準吧
07/18 23:08, 12F

07/18 23:10, , 13F
配stock是節省時間成本
07/18 23:10, 13F

07/19 01:54, , 14F
我在英國也這樣 剛來很意外XD
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07/19 01:57, , 15F
如果用量很少鐵定不準阿
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07/19 01:57, , 16F
而且reproducibility
07/19 01:57, 16F

07/19 15:24, , 17F
如果原po是用sigma lysozyme一個產品說明,那好像在誤導喔
07/19 15:24, 17F

07/19 15:25, , 18F
那一句話,是來自powder的說明,跟你配成stock是不一樣的
07/19 15:25, 18F

07/19 15:26, , 19F
甚至,你沒看For E.coli cell lysis,這段,清楚寫著freshly
07/19 15:26, 19F

07/19 15:29, , 20F
prepared字眼,如果你不確定stock放多久,反倒是你的有問題
07/19 15:29, 20F

07/19 15:33, , 21F
如果你的點是沒照定量隨便取的確不好,可是講powder就得斟酌
07/19 15:33, 21F

07/21 00:46, , 22F
直接取powder+1 剛學的時候也很shock~~~
07/21 00:46, 22F

07/21 12:42, , 23F
如果敢在paper裡methods寫用podwer被accept我就沒話說
07/21 12:42, 23F

07/21 13:16, , 24F
你知道fresh prepare的意思嗎? 肯定不是配成stock的
07/21 13:16, 24F

07/21 13:17, , 25F
我會寫秤好多少powder,直接加到lysis buffer裡面
07/21 13:17, 25F

07/21 13:20, , 26F
另外還是請你確認一下,你的lysozyme配成的stock可以放多久
07/21 13:20, 26F

07/21 13:33, , 27F
其實與其用PBS或水等配成stock放著去degrade,或用一次丟掉
07/21 13:33, 27F

07/21 13:35, , 28F
跟秤好powder用lysis buffer去溶,不就是換個溶劑,有何奇怪?
07/21 13:35, 28F

07/21 16:55, , 29F
了解, 謝謝樓上
07/21 16:55, 29F

07/24 15:04, , 30F
我也會每次從粉末開始配新的..paper就寫終濃度就好
07/24 15:04, 30F

07/29 23:08, , 31F
藥勺是乾淨的,沒有沾到lysis buffer再碰到power應該就還好吧
07/29 23:08, 31F

07/29 23:08, , 32F
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文章代碼(AID): #1JnytQL8 (Biotech)
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