[求救] DNase處理的有無

看板Biotech (生命科學)作者 (劍3 ing)時間11年前 (2014/07/24 15:40), 編輯推噓0(007)
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請問一下 用Trizol抽完RNA後 在轉cDNA之前 一定要加DNase嗎? 因為我在chloroform分層後取上清液時都會留一段不要取 若是沒有DNase treatment的話 代表後續的qPCR實驗的結果都不可信嗎? (Tm值單一 跑膠single band 但primer設計沒有特別注意有無跨intron) --很不想重做的菸酒生-- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.80.2 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1406187655.A.8D7.html

07/24 16:08, , 1F
你轉cDNA時做一組沒有RT enzyme的control 跟著跑Q
07/24 16:08, 1F

07/24 16:08, , 2F
從結果就可以知道可不可信了
07/24 16:08, 2F

07/24 16:35, , 3F
好窩 感謝
07/24 16:35, 3F

07/27 15:19, , 4F
我的經驗是genomic DNA 影響 若是plasmid transfection
07/27 15:19, 4F

07/27 15:19, , 5F
不處理DNase 就很容易p 到大量plasmid
07/27 15:19, 5F

07/27 17:47, , 6F
genomic DNA 影響不大 但plasmid transfection 影響很大
07/27 17:47, 6F

07/27 17:47, , 7F
嚴謹起見最好要做
07/27 17:47, 7F
文章代碼(AID): #1JqBY7ZN (Biotech)
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