[求救] pyrosequencing dNTP濃度

看板Biotech (生命科學)作者 (songla~)時間11年前 (2014/07/25 16:47), 編輯推噓1(105)
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發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等)之分讓, 請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作 簽署材料分讓協議(MTA),否則版工將逕行刪除 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- 最近實驗室開始做pyroscequencing的實驗 因為沒有要用到前PCR 只有單純做Pyro的部分 但因為實驗要求 需要調整dNTP的濃度 但上網查都只有做PCR需要的濃度而已 廠商那邊也不願意告訴我們配方 所以想請問有經驗的各位 在pyrosequencing時 dATPas / dNTP的濃度大約是多少呢? 感謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.133.91 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1406278050.A.CB6.html

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基本上自行調整dNTP只有可能造成Pyro失敗,因為pyro是一個連
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續四個Enzyme的連續反應,只要dNTP濃度不對,四個Eznyme的反
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應就可能反正不完全,造成DATA有問題,另外就算知道了dNTP濃
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度,每個pyro使用的cartriadge都有不同的method來丟出dNTP跟
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Enzymes(維持反應的精細度)
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你是在問sequencing的時候cartridge A/T/C/G 所需要的用量?
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文章代碼(AID): #1JqXcYos (Biotech)
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