[求救] Elisa dilution

看板Biotech (生命科學)作者heartear (Spark)時間11年前 (2014/09/02 22:48)推噓1(1推 0噓 0→)

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版上各位大大好最近小弟在做國科會的大專生計劃實驗的一個重要部分是要測mice oxytocin conc. 最近在做ELISA時遇到一些疑惑看protocol有些看不懂 / 版上爬過文想詢問有做ELISA實驗的大家協助我解惑謝謝 1.關於Recovery 跟 Dilutional Linearity的意思我使用的是Enzo 的 OXT ELISA kit protocol 在這裡 http://ppt.cc/ftaT 想詢問廠商做了這些recovery跟linearity test數據是給予參考用的嗎還是我需要在做實驗之前也做份針對自己serum sample的嗎? 2.Recommended dulition kit說明書尾列出了建議的dilution 其中關於serum是 1:8 我依此建議做了數次實驗後得出的值也都在standard surve的有效範圍中然而做完我有個疑惑:要將濃度值回乘8倍嗎? (之前做沒稀釋的sample全都在curve外) 以及是否要做校正找出我的sample適合怎樣的稀釋倍率呢?(有這樣的test嗎) 3.關於sample的做法我以會採全血的方式蒐集過程中會加EDTA然後再離心取上清在儲存到-80度一個月內做ELISA 但看protocol說到EDTA可能干擾conjugate (chelator的關係) 是否有可以不需要用到EDTA的方法呢? 看到前幾篇文提到放在室內自然凝血這方法是指我抽完後直接放在那等到凝固再離心取上清嗎? (想問這樣的話會不會影響到oxytocin) 以上幾個疑惑希望有做過相關的人可以給些建議或操作的經驗分享非常感謝~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 140.112.58.52 ※ 文章網址: http://www.ptt.cc/bbs/Biotech/M.1409669282.A.935.html